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聯系我們胰酶使用注意及貼壁細胞的消化
點擊次數：2636 更新時間：2016-04-25
胰酶為類白色至微帶黃色的粉末;微臭，但無霉敗的臭氣;有引濕性;水溶液煮沸或遇酸即失去酶活力。胰酶是胰蛋白酶、胰淀粉酶、胰脂肪酶的混合物。在中性或弱堿性條件下活性較強，胰蛋白酶能使蛋白質轉化為蛋白胨，胰淀粉酶能使淀粉轉化為糖，胰脂肪酶則能使脂肪分解為甘油及脂肪酸，從而促進消化、增進食欲。
胰酶主要用于消化不良，食欲不振及肝、胰腺疾病引起的消化障礙，同時也適用于先天性胰功能不全、腹部手術和外傷胰腺切除導致的胰功能不全。或未經手術切除后天引起的胰功能不全及酒精中毒引起的慢性胰腺炎等。
胰酶使用注意及貼壁細胞的消化：
1．在使用胰酶細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染。
2．胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長，否則細胞鋪板后生長狀況會較差。
貼壁細胞的消化：
1．吸去培養液，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清
2．加入少量胰酶細胞消化液，略蓋過細胞即可，根據胰酶效率差異可以增加惑減少胰酶用量。室溫放置30秒至2分鐘（不同的細胞消化時間有所不同）
3．顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變化呈白茫狀；或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來。
4．此時吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的*細胞培養液，吹打下細胞，即可直接用于后續實驗如果發現消化不足，則加入胰酶細胞消化液重新消化。鈣離子、鎂離子和血清蛋白的存在會降低胰酶活力。因此，胰酶溶液常用無Ca2+、Mg2+的D-Hanks’ 平衡鹽溶液配制成0.25%溶液。消化細胞時，加入一些血清或含血清的培養液，或胰蛋白酶抑制劑能終止胰蛋白酶對細胞的消化作用。
如果發現細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落，直接用胰酶細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000-2000g離心1分鐘，沉淀細胞，盡量去除胰酶細胞消化液后，加入含血清的*培養液重新懸浮細胞，即可用于后續實驗。
