胰酶貼壁細胞的消化
點擊次數(shù):1319 更新時間:2016-06-23
胰酶是自豬胰中提取的多種酶的混合物,主要為胰蛋白酶、胰淀粉酶與胰脂肪酶。按干燥品計算,每1g中含胰蛋白酶不得少于1800活力單位,胰淀粉酶不得少于21000活力單位,胰脂肪酶不得少于12000活力單位。必要時可用蔗糖或低倍胰酶稀釋。
胰酶是胰蛋白酶、胰淀粉酶、胰脂肪酶的混合物。在中性或弱堿性條件下活性較強,胰蛋白酶能使蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化為蛋白胨,胰淀粉酶能使淀粉轉(zhuǎn)化為糖,胰脂肪酶則能使脂肪分解為甘油及脂肪酸,從而促進消化、增進食欲。主要用于消化不良,食欲不振及肝、胰腺疾病引起的消化障礙,同時也適用于先天性胰功能不全、腹部手術(shù)和外傷胰腺切除導致的胰功能不全?;蛭唇?jīng)手術(shù)切除后天引起的胰功能不全及酒精中毒引起的慢性胰腺炎等。
胰酶使用注意:
1、在使用胰酶細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染。
2、胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長,否則細胞鋪板后生長狀況會較差。
胰酶貼壁細胞的消化:
1、吸去培養(yǎng)液,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清
2、加入少量胰酶細胞消化液,略蓋過細胞即可,根據(jù)胰酶效率差異可以增加惑減少胰酶用量。室溫放置30秒至2分鐘(不同的細胞消化時間有所不同)
3、顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化呈白茫狀;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來。
4、此時吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的*細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入胰酶細胞消化液重新消化。