Roche 高效DNA地高辛標記和檢測試劑盒I 產品介紹: 高效地高辛(DIG)標記探針可應用于RNA雜交,DNA雜交,點雜交分析等,同時也可用于克隆和噬菌斑雜交。試劑盒使用DIG-11-dUTP(堿不穩 定性)隨機引物標記DNA模板并對DIG標記雜交物進行顯色檢測。試劑盒備有結合儲存液NBT/ BCIP,現有的封閉液和DIG易雜交顆粒。高效DIG混合物包含穩定Klenow enzyme(克列諾酶),核苷酸,引物和反應緩沖液。 Roche 高效DNA地高辛標記和檢測試劑盒I 檢測原理: 高效DNA地高辛標記檢測試劑盒I是用地高辛(Digoxigenin,簡稱DIG;又稱異羥基洋地黃毒甙元,是一種類固醇半抗原分子)標記的DNA探針,應用于分子雜交和隨后的顯色反應檢測。羅氏公司的該試劑盒檢測主要分三階段進行:1)DNA標記:根據隨機引物標記技術,生成DIG地高辛標記的DNA探針。2)雜交:按照標準雜交方法進行,將地高辛標記的DNA探針用于核酸點雜交,可選擇帶正電的尼龍膜或純硝酸纖維素膜作為雜交膜。 3)免疫學檢測:首先將標記有AP的地高辛抗體與雜交探針免疫結合;通過檢測堿性磷酸酶與NBT/BCIP底物進行顯色反應的數值,從而達到免疫檢測的目的。 靈敏度和特異性:標準檢測使用1µg線狀pBR328。通常需要0.8µg標記DNA(標記1小時后)和 2.3µg標記DNA(20小時反應后)。在點雜交過程中,16小時顯色后(探針濃度20ng/ml)可以檢測到0.1pg同源DNA。DNA印跡中,加 載1µg消化胎盤DNA可檢測到單拷貝基因(tPA)。 地高辛引物標記優點:質粒、柯斯質粒和λ噬菌體DNA均可作為模板,模板DNA(線狀或超螺旋)標記10ng-3µg引物都具有同樣的標記效率。 產品組成成份: ? DIG-High Prime, 5x conc., 50 µl ? DIG-labeled Control DNA, 20 µl, (5 µg/ml) pBR328 (linearized with Bam HI) ? DNA Dilution Buffer, 3 x 1 ml ? Anti-digoxigenin-AP Conjugate, 100 µl ? NBT/BCIP Stock Solution, conc., 6 x 1 ml ? Blocking Solution, 10x conc., 4 x 100 ml ? DIG Easy Hyb Granules, 4 x 100 ml
Roche作為zui大的生物技術公司,羅氏在抗腫瘤、抗病毒、炎癥、代謝和中樞神經系統等領域擁有*的差異化藥物。羅氏在體外診斷和基于組 織的腫瘤診斷市場中享有,同時也是糖尿病管理領域的者。Roche公司生產的DIG標記DNA檢測試劑盒在DNA、RNA和核酸點雜交等實驗 應用中有出色表現,特別是第二代試劑盒使用CSPD化學發光檢測具有更高的準確度和靈敏性。
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